分离核糖体的实验步骤

可以更换蔗糖铺垫液2至3次直到获得干净的沉淀物， 2 以100000g离心16小时来沉降70S核糖体，将不含细胞碎片的粗制裂解液以1：1的比例铺到1.1 mol/L的蔗糖溶液之上，同时分离30S和50S核糖体亚基，而50S或30S亚基则不沉淀，至少应用高盐溶液洗两次以确保将非核糖体沉淀去除掉， 为从剩余的细胞组分中分离核糖体，于 4℃ 在Beckinan 50.2 Ti 恒定角度转头中离心，为除去蔗糖，然后于4℃以10000g离心10分钟使悬液澄清， 4 以55000g离心12小时，对于产甲烷菌、盐杆菌及硫代谢嗜热菌。

3 以100000g离心24小时，可贮存于 -80℃ 中，将含有核糖体的沉淀贮存于-80℃。

以150000g离心3小时，用不含蔗糖的上述缓冲液漂洗并将沉淀重悬，然后悬于200μl重悬缓冲液中，用重悬缓冲液洗沉淀物。

，较低的离心速度用于初步将70S核糖体沉淀出来，沉淀中含有多核糖体，这一过程包括长时间的离心以使70S核糖体沉降，。