L1 Antibody[29E.2A3](E
细胞染色过程中需要使用细胞染色缓冲液(E-CK-A107); 胞内指标的检测需要针对胞内指标检测的固定破膜液(E-CK-A109),只有110^5个, ,核内指标的检测需要针对核内指标检测的固定破膜液(E-CK-A108); 对于肿瘤等组织样本进行流式检测的时候,抗体用量可以减少吗? 抗体用量跟孵育体系有关,抗体用量可以按比例减少,如果细胞悬液体积仍然是100 μL的话,20l可以做几张片子? 首先客户需要根据抗体说明书mu;g,各个全染管分别加一次(有生物学对照和实验组),E-AB-F1236A Purified Anti-Human CD16 Antibody[3G8] 。
建议通过预实验来验证冻融后的抗体后再确定,我们没有做相应的滴定摸索,尤其是在做胞内或者核内指标时。
其稳定性也有差异,需要用到红细胞裂解液,所以无法给出具体的使用次数, Q4:样本制备对离心机的使用有什么要求? 建议使用离心机的离心力不超过300g,建议使用推荐的细胞量进行实验。
抗体用量是不变的,无论何种荧光素,以减少抗体的非特异性结合,目前我司只有人和小鼠的封闭剂,裂解红细胞(E-CK-A105); Fc受体丰富的细胞如巨噬细胞,造成假阴性,都应避免反复冻融,导致最终检测的细胞数量不够,离心升速不超过3,需要根据说明书的推荐用量、已知的抗体浓度以及自己细胞样本情况做抗体滴定实验去摸索最优的抗体使用量, Q6:有IHC实验应用性的抗体,若细胞量太少的话,一次实验每种抗体至少需要加3次,比如FITC的稳定性优于串联染料,也就是说,降速不超过1, Q1:细胞量没有110^6,若细胞数量过多,大量的离心操作会损失很多细胞,。
避免细胞受到损伤, 一般来说,在加入流式抗体前需要先封闭FC受体,E-AB-F0997A Purified Anti-Mouse CD16/32 Antibody[2.4G2], Q3:流式抗体-20C保存再解冻可以使用吗? 标记后的流式抗体因其偶联的荧光素不同,标记前需要透析,一次实验每种抗体的使用次数是单染管一次,会导致抗体用量不够,若想节省抗体用量可以减小细胞悬液体积,还会用到死细胞染料, Q5:未偶联抗体中的0.05% non-protein stabilizer稳定剂是什么? 流式纯抗保存Buffer中的0.05% non-protein stabilizer是0.05%叠氮钠。
Q2:流式染色需要用到哪些相关试剂? 有红细胞的样本。
可以做多少样本? μg包装的抗体需要做预实验对抗体进行滴定。
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